细胞培养时培养基中谷氨酰胺L-glutamine的作用

对于所有的哺乳类动物细胞而言，L-glutamine(L-谷氨酰胺)是细胞生长的一种必须氨基酸，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和核酸代谢。

所有固体包装的培养基都含有L-glutamine，但L-glutamine在溶液中不稳定、易分解，商品化的液体培养基不含L-glutamine。L-谷氨酰胺在溶液中状态不稳定，经过一段时间后会降解，它的降解速率随保存时间，保存温度及保存环境pH值等变化而变化，确切的降解率一直没有确定。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质的重要原材料，在细胞培养中，几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求，细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质，谷氨酰胺缺乏会导致细胞生长不良甚至死亡。所以如果原来培养基中不含L-glutamine，应在使用前加入适量的L-glutamine。在配制多数细胞培养液时都需补加一定量的谷氨酰胺。由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，故应单独配制，置于-20℃ 冰箱中保存，用前加入培养液中。加有L-glutamine培养基在4℃冰箱中储存2周以上时可能已经降解，应重新加入原来量的谷氨酰胺。

各种培养基的L-glutamine的浓度不同，如M199含有0.68mM的L-glutamine，DMEM含有4mM的L-glutamine。

 

误区

正常情况下，如果正确使用谷氨酰胺，一般是不需要要额外补加，正确用法如下：

1. 4℃避光保存；

2. 分装，不要反复预热；

3. 含有谷氨酰胺的培养基，开封后应尽快用完。

 

 

另外，细胞中的常见的添加物还有胰岛素（Insulin）和β-巯基乙醇（β-mercaptoethanol）、丙酮酸钠（Sodium Pyruvate）、L-谷氨酰胺、青霉素-链霉素