细胞培养时抗生素用法
双抗介绍
成分:双抗就是青链霉素混合液,青链霉素混合液(100X) 双抗,是专门用于细胞培养的,可以直接添加到细胞培养液内。
工作浓度:青霉素-链霉素溶液(100X)中,青霉素的含量为10000U/ml,链霉素的含量为10mg/ml。在细胞培养液中推荐的青霉素的工作浓度为100U/ml,链霉素的工作浓度为0.1mg/ml。
作用:抗生素,抑制细菌生长;避免细胞污染。重点是抑制生长而不是灭菌哦。
建议
理论上在培养自其它实验室引进之细胞株时,培养基须添加抗生素,待通过污染测试后,大量培养时则不加抗生素,无论单抗、双抗。在细胞染菌初期,建议加入双抗进行抢救。
但是当进行无血清培养时则建议最好不加双抗,因为在没有血清的保护,而细胞此时又比较脆弱,给容易受到双抗的毒副作用影响。目前大多数细胞培养实验者,均已按照流程选择正常加入双抗,抑制细菌的生长,来保证细胞健康繁殖。当然加双抗不是百分百有效的方法。要防止污染除了使用双抗还如要注意污染源大多来自换液和消化时的操作不正规,如果你在处理细胞得操作过程不规范,即便加入双抗也很难避免污染除去。所以保证细胞处理过程或培养基配制过程中的无菌操作才是关键。
误区:
长期添加抗生物素,以对抗污染
常规培养细胞时不应常使用抗生素;连续使用抗生素会促使抗生素耐药株的产生,导致轻度污染一直存在,一旦将抗生素从培养基中取出,这种轻度污染最终将发展成大规模污染;
连续使用抗生素会掩盖支原体感染及其他阴性污染;
有些抗生素会与细胞发生交叉反应,干扰研究的细胞过程。
2022年11月4日 10:38