EDU检测细胞增殖
1. 技术简介
EdU (5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,能够在DNA复制时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在合成的DNA分子中,基于EdU与荧光染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数,是一种新型的细胞增殖检测方法。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、器官的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。
EDU能够竞争性地渗入正在复制的DNA分子中,从而达到标记分裂细胞的目的。在进行体内实验,观察和研究移植细胞的分化、迁移、存活、分布的时候,EDU标记可以起到细胞示踪的作用。
2. 实验流程
(1)对目的细胞进行常规的细胞培养;
(2)细胞处理:根据实验需要进行各种药物处理或者细胞转染;
(3)EdU标记:细胞培养液以1:1000的比例稀释EdU溶液(试剂A),制备适量50μM EdU培养基,每孔每次加入100 μL 50μM EdU培养基孵育2小时;
(4)细胞固定;
(5)对细胞进行细胞核DAPI染色;
(5)Apollo染色;
(6)图像获取及分析。
3. 客户提供
(1)实验用的细胞、药物、质粒等材料;
(2)细胞处理要求,如分组、药物处理量和时间等;
(3)材料等使用说明。
4. 结果案例
2022年7月29日 12:18