RNA Pull down

1. 技术简介

  随着高通量测序技术的发展，越来越多的长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）被注释出来，RNA pull-down作为研究RNA与蛋白互作的核心技术，已成为研究焦点。RNA pull-down是以目的RNA序列为中心，寻找或验证与该RNA片段结合的蛋白质。对目的RNA片段产物进行生物素标记，通过链霉亲合素固定到磁珠上,当目的RNA与蛋白质发生结合后，再将其余游离的蛋白质洗脱，即得到核酸与蛋白质结合产物。

用体外转录法标记生物素RNA探针，然后与胞浆蛋白提取液孵育，形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过western blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。

 

 

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2. 技术原理

RNA Pull down实验原理

 

 

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3. 实验流程

 

 

 

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4.客户提供

（1）基因信息（物种，Genebank登录号或者序列）；

（2）基因模板，如无可以委托我们进行全基因合成；

（3）细胞样本或者组织样本。

 

 

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5. 结果交付

（1）RNA凝胶电泳图；

（2）RNA Pull down后的SDS PAGE电泳图；

（3）WB或者质谱检测数据；

（4）实验报告，包含实验仪器、材料和试剂、实验方法和数据分析。