RIP RNA结合蛋白免疫共沉淀

1. 技术简介

RIP(RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay，RNA结合蛋白免疫沉淀)是研究细胞内RNA与蛋白结合情况的技术，是了解转录后调控网络过程中的有力工具。这种技术运用针对目标蛋白的抗体把相应的抗原蛋白-RNA复合物沉淀下来，经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行qPCR或者RIP-Seq分析。RIP-Seq将RIP技术与高通量测序相结合，能够高通量地检测与特定蛋白结合的RNA。

目的蛋白的抗体结合于磁珠上，与细胞内的抗原蛋白-RNA复合物孵育，由于抗原抗体的作用，会形成磁珠-抗体-抗原蛋白-RNA的复合体，通过磁珠讲该复合体拉下来后，经过洗脱获取抗原蛋白-RNA产物，该产物经过RNA纯化后即可获取到诱饵蛋白结合的RNA。

 

 

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2. 实验路线

RNA Pull down技术路线

 

 

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3. 客户提供

（1）目的蛋白基因信息（物种、Genebank登录号或基因序列）

（2）目的蛋白抗体，若无抗体，可提供目的基因的质粒，构建融合标签的目的蛋白质粒；

（3）实验样本及其信息（样本类型、样本量）

 

 

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4. 结果交付

（1）诱饵蛋白的Western blot检测数据；

（2）剩余的实验的样本和RIP产物；

（3）剩余的实验的样本和RIP产物；

（4）qPCR结果（或者SEQ鉴定结果）；

（5）详细的实验报告（包含实验仪器、耗材和试剂、实验方法、结果分析）