双荧光素酶报告基因检测
2022-12-27
双荧光素酶检测转录因子调控活性
结合双荧光素酶报告系统,将启动子DNA序列插入到报告基因载体,与转录因子共同转染细胞,若该DNA片段具有启动子活性,则可以检测到相应的双荧光素酶荧光值。
2022-07-30
双荧光素酶检测启动子活性
结合双荧光素酶报告系统,将启动子DNA序列插入到报告基因载体,若该DNA片段具有启动子活性,则可以检测到相应的双荧光素酶荧光值。
双荧光素酶检测miRNA靶标
Pull down实验
通过将诱饵蛋白通过非抗体亲和系统固定到基质上,从而获取与已知诱饵蛋白结合的蛋白或配体
2022-07-29
CoIP免疫共沉淀
免疫共沉淀是研究蛋白与蛋白互作的一种常用的方法,其原理基于抗原-抗体免疫反应,利用抗体结合于琼脂糖磁珠上的Protein A/G,在蛋白液中加入抗原特异的抗体进行孵育,当抗体免疫沉淀抗原蛋白时,能与抗原蛋白结合的目的蛋白一并被沉淀下来
RNA Pull down
用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过western blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。
2022-04-27
RIP RNA结合蛋白免疫共沉淀
这种技术运用针对目标蛋白的抗体把相应的抗原蛋白-RNA复合物沉淀下来,经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行qPCR或者RIP-Seq分析。
DNA Pull down
DNA Pull down是以一段DNA序列为诱饵,寻找与该DNA结合的蛋白。是研究DNA与蛋白最有力的工具,最常用于转录因子与启动子的结合验证。
ChiP 染色质免疫沉淀
CHIP 是目前研究体内 DNA 与蛋白质相互作用的方法,不仅可以检测体内转录因子因子与 DNA 的动态作用,还可以用来研究组蛋白的共价修饰与基因表达的关系
2022-04-07